راه اندازی روش اختصاصی و حساس Real-Time PCR به منظور تشخیص گونه های بروسلا

author

Abstract:

 مقدمه و هدف: بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام ویک مشکل بهداشت عمومی در سراسر جهان می باشد.بروسلوز باعث سقط جنین ،اختلالات باروری ،عفونت های تناسلی،کاهش شیر،اورتریت و اپیدیدیمیت در میزبان اصلی می شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل هزینه های درمانی فراوان به بیماران و ضررهای اقتصادی زیاد به دامداران می گردد.این بیماری،در تمام نقاط ایران پراکنده است و ایران یکی ازمناطق آندمیک آلودگی به تب مالت است. شناسایی صحیح و سریع عامل بیماری یکی ازعوامل مهم جهت کنترل و پیشگیری بیماری می باشد.با وجود پیشرفت هایی که در تکنیک های کشت خون و تست های سرولوژیکی که برای کشف آنتی بادی های اختصاصی به دست امد،هنوز مشکلات مهمی در تشخیص بروسلوزیس وجود دارد بنابراین نیاز به ازمون های جدید آزمایشگاهی می باشد.یکی از جدیدترین روش های سنجش کمی که در حال حاضرمورد توجه بسیاری از محققین قرار گرفته همین روش ها ی تشخیص محصول PCR در زمان واقعی(Real Time) است.هدف ما هم از این مطالعه بهینه سازی شناسایی باکتریهای جنس بروسلا در نمونه های مشکوک از نظر سرولوژیکی بوسیله روش Taqman Real-Time PCR می باشد. مواد و روش ها: 45 نمونه مثبت (خون گوسفند) از نظر تستهای سرولوژیکی از چندین شهرستان در استان مازندران در طی 3 ماه تهیه گردید.پس از استخراج DNA نمونه ها با استفاده ازکیت MBST،واکنش Real-Time PCR TaqManبراساس ژن bcsp31 و با استفاده از دستگاه Corbett 6000 روی نمونه ها انجام گرفت.  نتایج و بحث: از 45 نمونه مشکوک تنها 20 نمونه از نظر حضور باکتریهای جنس بروسلا با استفاده از روشReal-Time PCR TaqMan مثبت بودند. تشخیص بروسلوز بواسطه شباهت علائم بالینی آن با بسیاری از بیماری ها و عدم وجود روش های صحیح تشخیصی اغلب دشوار است.یکی ازروشهای دقیق که میتواند مقادیر جزئی باکتری را شناسایی نماید،روشهایReal-Time PCR TaqMan می باشد که در آن علاوه بر یک جفت پرایمراختصاصی،یک پروب اختصاصی نشاندار شده با ماده فلورسنت اختصاصیت روش را به بالاترین میزان خود رسانده است. همچنین به دلیل حذف Post-PCR در تکنیک Real-Time PCR امکان وقوع Carry over و پاسخ مثبت کاذب نیز منتفی می گردد. مطالعه ما نشان می دهد که بخش زیادی از نمونه های مشکوک به بروسلوزیس در حقیقت فاقد عفونت با جنس بروسلاهستند.  

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

راه اندازی روش اختصاصی و حساس real-time pcr به منظور تشخیص گونه های بروسلا

مقدمه و هدف: بروسلوز یک بیماری مشترک بین انسان و دام ویک مشکل بهداشت عمومی در سراسر جهان می باشد.بروسلوز باعث سقط جنین ،اختلالات باروری ،عفونت های تناسلی،کاهش شیر،اورتریت و اپیدیدیمیت در میزبان اصلی می شود و از این جهت باعث عوارض مزمن و تحمیل هزینه های درمانی فراوان به بیماران و ضررهای اقتصادی زیاد به دامداران می گردد.این بیماری،در تمام نقاط ایران پراکنده است و ایران یکی ازمناطق آندمیک آلودگی ب...

full text

ارزیابی روش real-time pcr multiplex به منظور شناسایی گونه های شایع باکتری بروسلا

سابقه و هدف: بیماری بروسلوز یک بیماری مشترک انسان و دام است. با توجه به ویژگی هایی مانند سخت رشد بودن، خطرات مرتبط با کشت و وجود واکنش های متقاطع با باکتری های دیگر در آزمون سرولوژیک، در مطالعه حاضر روش real-time pcr multiplex به منظور شناسایی گونه های شایع باکتری بروسلا (brucella) ارزیابی شد. مواد و روش ها: این مطالعه تجربی در دانشگاه علوم پزشکی همدان و در سال 1394 در دو مرحله بیوانفورماتیکی و...

full text

راه اندازی روش real-time pcr به منظور شناسایی مستقیم حساسیت به کلاریترومایسین در هلیکوباکتر پیلوری

سابقه و هدف: مقاومت هلیکوباکتر پیلوری به کلاریترومایسین تا حد قابل توجهی باعث کاهش اثرات درمانی داروی مذکور گردیده است. هدف از این پژوهش ارزیابی روش مستقیم real-time pcr و مقایسه آن با روش دیسک دیفیوژن برای شناسایی مقاومت به کلاریترومایسین در هلیکوباکتر پیلوری می باشد. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت تجربی برروی 45 نمونه بیوپسی تهیه شده از بیماران دارای اختلالات گوارشی انجام شد. در تمامی نمون...

full text

راه اندازی روش Real-time PCR برای تشخیص و تعیین کمی ویروس سرخک با استفاده از ژن F

سابقه و هدف: با وجود کنترل بیماری سرخک در جهان، اما گزارش‌هایی از ابتلا به این ویروس در جمعیت‌های واکسینه شده وجود دارد. بنابراین تشخیص دقیق و به‌موقع این ویروس ضروری است. روش‌های جدید مولکولی در تشخیص ویروس ارائه شده است که توان تعیین مقدار این ویروس را ندارند. هدف از این پژوهش راه اندازی روش Real-time PCR با استفاده از ژن F ویروس سرخک می‌باشد. مواد و روش‌ها: این مطالعه با ط...

full text

راه اندازی روش Real-time PCR برای تشخیص و تعیین کمی ویروس سرخک با استفاده از ژن F

سابقه و هدف: با وجود کنترل بیماری سرخک در جهان، اما گزارش‌هایی از ابتلا به این ویروس در جمعیت‌های واکسینه شده وجود دارد. بنابراین تشخیص دقیق و به‌موقع این ویروس ضروری است. روش‌های جدید مولکولی در تشخیص ویروس ارائه شده است که توان تعیین مقدار این ویروس را ندارند. هدف از این پژوهش راه اندازی روش Real-time PCR با استفاده از ژن F ویروس سرخک می‌باشد. مواد و روش‌ها: این مطالعه با ط...

full text

تشخیص بروسلا ملیتنسیس به روش real-time pcr در نمونه های بالینی و دامی

جنس بروسلا، باکتری های درون سلولی اختیاری هستند که باعث ایجاد بیماری بروسلوزیس در انسان و دام می شوند. روش های تشخیصی مبتنی بر کشت با وجود آنکه استاندارد طلایی محسوب می شوند، حساسیت پایینی (تا 70%) دارند. آزمون های سرولوژیکی به دلیل ایجاد واکنش های متقاطع با سایر میکروارگانیسم ها و نبود الگوهای مناسب جهت تفسیر تیتر های آنتی بادی در مناطق اندمیک، قادر به رفع مشلات پیش روی تشخیص این بیماری نیستند...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 4  issue 1

pages  110- 110

publication date 2012-08-22

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023